（本文由浙江工商大学食品与生物工程学院陈敏实验室提供）

步骤：

1. 打开蒸汽发生器，检查所有阀门是否关死；
2. 打开发酵罐，向其内加入培养基；
3. 关上发酵罐，做好灭菌前准备，装上钟罩，进入灭菌流程。

灭菌前准备：

1. pH电极的标定——在控制面板上选择标定，点击PH标定，采用两点法校准（先将PH电极放入6.86校准液中，点击开始，待稳定后点击结束，再将PH电极插入4.00校准液中，点击开始，待稳定后点击结束，进行回测，如若不准，重新校准）；
2. 溶氧电极的标定——灭菌前标定，饱和亚硫酸钾中标零点，接种前将转速和通气量拉至最大标100%；
3. 空气进气口夹死，用纱布和铝箔纸包上空气过滤膜，尾气口用4层纱布和牛皮纸包上。

灭菌操作：

1. 打开阀门9，旋至最大，关闭阀门11，同时打开阀门12，阀门14，选择温度控制为手动控制，进行升温；
2. 当温度升至90℃时，打开阀门15和底阀，进行底部通蒸汽；
3. 当温度升到121℃时，开始计时，通过控制底阀和阀门12，使温度保持在121℃左右，灭菌20min。

灭菌结束：

1. 灭菌结束后，先关闭蒸汽发生器，然后关闭阀门9、阀门14和阀门15以及底阀，打开阀门11，将温度控制设定为自动，进行降温操作；
2. 当温度降至105℃以下时，打开阀门10，排出钟罩中内的蒸汽冷凝水，排完后关闭阀门10；
3. 当钟罩内压力降至0时，可以卸下钟罩；
4. 连接好空气进气口，打开阀门1、2、3、4，控制适宜的压力，装上电机，开启搅拌，设置合适的转速，保温过夜。

接种操作：

1. 接种前先取样进行镜检，待确定没有染杂的情况下进行接种操作；
2. 点燃火焰圈，放置于接种口处，打开接种口，倒入种子液，加入消泡剂；
3. 补水至适宜的量，选择合适的转速、通气量。

附图：